Awọn ibeere Iṣeduro PRC: Awọn ibeere Nigbagbogbo ati Awọn Solutions

Itọka Sinmrase polcrase (pcr) awọn aṣayẹwo pataki jẹ awọn irinṣẹ pataki ni isedale Molecular, gbigba awọn oniwadi lati wọ awọn ohun elo jiini si awọn iwadii ile-iwosan si awọn iwadii ile-iwosan si awọn iwadii ile-iwosan. Sibẹsibẹ, bii ẹrọ eyikeyi, AKIYESI PRC kan le ba awọn iṣoro ti o ni ipa lori iṣẹ rẹ. Nkan yii ṣafihan diẹ ninu awọn ibeere ti o wọpọ nipaAtilẹyin PRCLaasigbotitusita ati pese awọn solusan ti o wulo si awọn iṣoro to wọpọ.

1. Kilode ti o jẹ digi pcrt mi ko ṣe afihan?

Ọkan ninu awọn iṣoro ti o wọpọ julọ dojuko nipasẹ awọn olumulo ni ailagbara ti ifura pcr lati jẹri DNA ibi-afẹde. Eyi le ṣee ṣe afihan si ọpọlọpọ awọn okunfa:

Apẹrẹ akọkọ ti ko tọ: Rii daju pe awọn alakoko rẹ ni pato fun ọkọọkan ibi-afẹde ati ni iwọn otutu ti o dara julọ (TM). Lo awọn irinṣẹ sọfitiwia fun apẹrẹ alakọbẹrẹ lati yago fun disonpecific?

Dán awoṣe DNA: Daju pe o nlo iye to ti DNA ti awoṣe awoṣe. Ju kere si yoo ja si ailera tabi ko si Afọhun.

Awọn inhibitors ninu apẹẹrẹ: awọn akude ninu apẹẹrẹ le ṣe idiwọ Pchr. Wo mimọ DNA rẹ tabi lilo ọna isediwon ti o yatọ.

Ojutu: Ṣayẹwo apẹrẹ akọkọ rẹ, mu ifamọra awoṣe pọ, ati rii daju pe ayẹwo rẹ ko ni awọn inhibitors.

2. Kilode ti ọja PRC mi ni iwọn ti ko tọ?

Ti iwọn ọja PCC rẹ ko ba nireti, o le fihan iṣoro kan pẹlu awọn ipo ifura tabi awọn eroja ti a lo.

Aperitika ti ko pato: eyi le waye ti o ba jẹ pe alakoko kan si aaye ti a ko ṣe akiyesi. Ṣayẹwo pataki ti awọn alabẹrẹ nipa lilo ọpa bii apo-ina.

Iwọn otutu ti ko tọ si: Ti iwọn otutu ti igbalode ti ko kere ju, iyebiye ti kii ṣe pato le ja si. Iṣalaye ti iwọn otutu ti o ni itara nipasẹ PRR PRR.

Solusan: Jẹrisi ipinle Alakoso ati aipe iwọn otutu lati mu deede ni awọn ọja PCr.

3. Olumulo PRC mi ṣafihan ifiranṣẹ aṣiṣe. kini o yẹ ki n ṣe?

Awọn ifiranṣẹ aṣiṣe lori ododo ti PRC kan le jẹ itaniji nigbagbogbo, ṣugbọn wọn le pese awọn olomi nigbagbogbo si awọn iṣoro ti o pọju si awọn iṣoro.

Awọn ọran ti iṣelọpọ: Rii daju pe a ṣe atupale PRRC ti wa ni calibrated ni deede. Itọju deede ati awọn sọwedowo isamisi jẹ pataki si gbigba awọn abajade deede.

Ẹgbẹ sọfitiwia: Nigba miiran, awọn idun sọfitiwia le fa awọn iṣoro. Tun bẹrẹ kọmputa rẹ ki o ṣayẹwo fun awọn imudojuiwọn sọfitiwia.

Solusan: tọka si ilana olumulo fun koodu aṣiṣe aṣiṣe kan pato ki o tẹle awọn igbesẹ Laasigbotitusita ti a ṣe iṣeduro. Itọju deede le ṣe idiwọ ọpọlọpọ awọn iṣoro.

4. Kilode ti awọn abajade PRC ṣe n ṣe iyatọ bi?

Awọn abajade perconstistents le jẹ ibanujẹ fun awọn idi pupọ:

Didara isanra: rii daju pe gbogbo awọn reagents, pẹlu awọn ensaemu, awọn buffs, ati DNTPS, jẹ alabapade ati ti didara giga. Pari tabi awọn atunṣe ti doti le fa iyatọ.

Ipilẹṣẹ Cycler Cycler: Eto iwọn otutu ti ko ni ibamu le ni ipa lori ilana PCR. Nigbagbogbo ṣayẹwo isamisi ti cycler thermal nigbagbogbo.

Ojutu: Lo awọn reagents to gaju ati ki o jẹ ki cycler gbona rẹ nigbagbogbo lati rii daju awọn abajade deede.

5. Bawo ni lati mu imudarasi awọn aṣẹ prep?

Imudara imudara ti awọn aati pcr le ja si awọn eso ti o ga julọ ati awọn abajade igbẹkẹle diẹ sii.

Ṣiṣeto awọn ipo ijuwe: Idanwo lilo awọn ifọkansi oriṣiriṣi ti awọn alakọbẹrẹ, awoṣe DNA ati MGCL2. Idahun PCC kọọkan le nilo awọn ipo alailẹgbẹ fun iṣẹ ti o dara julọ.

Lo awọn efẹfẹ giga-giga: Ti o ba jẹ deede pataki, ronu lilo iṣẹ-iṣọkan giga giga lati dinku awọn aṣiṣe lakoko titobi.

Solusan: Ṣe ilana iṣapeye lati wa awọn ipo ti o dara julọ fun eto PCC rẹ pato.

Ni soki

Laasigbotitusita aAtilẹyin PRCLe jẹ iṣẹ ṣiṣe ti o ni agbara, ṣugbọn loye awọn iṣoro ti o wọpọ ati awọn solusan wọn le mu iriri pcr ṣe pataki. Nipa ipinnu awọn iṣoro wọnyi ti o wọpọ, awọn oniwadi le ṣe imudara awọn ẹbun prr ki o rii daju awọn abajade igbẹkẹle ni awọn ohun elo ti o ni ipese ti Molecular. Itọju deede, asayan ti o ṣọra ti awọn reagents, ati pe iṣalaye ti awọn ipo awọn ifura jẹ awọn bọtini si itupa prr ti o ṣaṣeyọri.